La Rivalità
Mentre il re Mitridate è lontano a combattere contro i romani, i suoi due figli si sono entrambi innamorati di Aspasia, la promessa sposa del re. Sifare, il figlio più giovane, soffre in un silenzio torturato — ama Aspasia ma non vuole disonorare suo padre. Farnace, il maggiore, non ha tali scrupoli: corteggia apertamente Aspasia e si è segretamente alleato con Roma. Aspasia stessa è intrappolata: ricambia l'amore di Sifare ma è vincolata dal dovere verso il re assente. Il governatore Arbate cerca di mantenere la pace, ma la rivalità tra i fratelli sta precipitando verso la catastrofe.
Mitridate's Return
Mitridate torna dalla guerra incoronato di allori — ma la vittoria all'estero non può mascherare il tradimento a casa. Sente immediatamente che qualcosa non va. Arbate lo informa del tradimento di Farnace: suo figlio maggiore ha corteggiato Aspasia e cospirato con Roma. Il ritorno a casa del re si fa amaro. Nel frattempo, Ismene, la principessa partica promessa a Farnace, osserva il suo fidanzato ignorarla e inseguire l'altra donna. Sopporta il rifiuto con silenziosa dignità.
Suspicion and Test
Mitridate conferma i suoi sospetti su Farnace ed esplode di rabbia. Ma la furia del re è calcolata oltre che ardente — ordisce un crudele test per Aspasia, fingendo di liberarla dal loro fidanzamento per vedere se rivelerà i suoi veri sentimenti. Farnace, scoperto, inizia a sentire i primi morsi di colpa. L'alleanza politica con Roma che sembrava così astuta ora appare come un cappio.
Sifare and Aspasia
Sifare e Aspasia si incontrano per quella che credono possa essere l'ultima volta. Sifare deve partire — il sospetto di suo padre sta crescendo — e l'addio è devastante. Canta l'aria più bella dell'opera, rivelando finalmente la profondità del suo amore. Aspasia, rimasta sola, si confronta con la sua situazione impossibile in una musica di straordinaria potenza emotiva. I due personaggi più simpatici dell'opera sono schiacciati da forze al di là del loro controllo.
Mitridate's Fury
La verità completa emerge: entrambi i figli amano Aspasia. Farnace confessa la sua colpa, ma è troppo tardi perché la confessione possa aiutare. Mitridate, tradito dal proprio sangue, si spoglia di ogni pietà. Condanna Aspasia a morte e dichiara che nessun figlio sarà risparmiato. L'ira del re è totale e terribile — il guerriero che ha affrontato le legioni di Roma senza vacillare è distrutto dalla slealtà della propria famiglia.
Gli Amanti
Con la morte che incombe, Sifare e Aspasia non hanno più nulla da nascondere. Dichiarano il loro amore apertamente in un duetto di straziante tenerezza — se non possono vivere insieme, affronteranno qualunque cosa venga fianco a fianco. È il culmine emotivo dell'opera: due persone che scelgono l'amore sulla sopravvivenza, le loro voci che si intrecciano in una musica che trascende le convenzioni dell'opera seria.
La Battaglia
I Romani attaccano. Mitridate, nonostante tutto, esce per affrontare il suo nemico di una vita per l'ultima volta. Sifare, dimostrando la sua lealtà attraverso l'azione, combatte al fianco di suo padre. Anche Farnace, trasformato dal senso di colpa e dall'amore paziente di Ismene, si volta contro i suoi alleati romani e si unisce alla battaglia. L'ultima tentazione di Marzio cade nel vuoto. Aspasia, credendo che tutto sia perduto, contempla di togliersi la vita piuttosto che sottomettersi a un matrimonio forzato.
Riconciliazione
Mitridate viene riportato dal campo di battaglia, mortalmente ferito ma vittorioso. Nei suoi ultimi momenti, il re morente fa ciò che sembrava impossibile: perdona entrambi i figli. Benedice il matrimonio di Sifare e Aspasia, riconosce la redenzione di Farnace e muore dichiarando che il Pontus non cederà mai al Capitol. Il quattordicenne Mozart trasformò un convenzionale lieto fine in qualcosa di genuinamente commovente — l'ultimo dono di un padre ai figli che lo hanno deluso.